产品编号 | 商品品牌 | 产品名称 | 产品包装 | 产品价格 |
AE3566 | ALPHABIO | Monoclonal Anti-cGMP Antibody Based Direct cGMP ELISA Kit | 96T | ¥4500.00元 |
产品描述:
环磷酸鸟苷(鸟苷-3´,5´-环化一磷酸,cGMP)在许多生理过程中发挥着重要的调控作用。cGMP由鸟苷酸环化酶产生,而被磷酸二酯酶降解,因此激活鸟苷酸环化酶或者抑制磷酸二酯酶可以提高细胞内cGMP的含量。研究发现,cGMP特异性磷酸二酯酶的抑制剂可用于治疗人类疾病,如cGMP特异性磷酸二酯酶第5类型(如伟哥和西力士)可用于治疗勃起功能障碍等疾病。
因此为筛选出腺苷酸环化酶的激活剂或磷酸二酯酶的抑制剂,需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cGMP的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响,这一个初筛是有必要的。
目前商业化提供的一些cGMP检测试剂盒主要使用的是非亲和纯化的cGMP多克隆抗体。尽管据称有特异性,但这些多克隆抗cGMP抗体与cAMP和GTP呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中,cGMP含量低于cAMP100倍。
Alphabio的cGMP_ELISA检测试剂盒使用的是独一无二的鼠单克隆抗cGMP抗体,该单克隆抗cGMP抗体的特异性比cAMP、GTP等类似的小分子高出108倍以上。相较于其他的多克隆抗体cGMP试剂盒,Alphabio的 cGMP_ELISA试剂盒能显著的提高其灵敏性和特异性,且能有效避免来自动物多克隆抗体的批次间差异, 因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。
此外,其他ELISA试剂盒的多克隆抗cGMP抗体与乙酰化cGMP的亲和力明显高于非乙酰化cGMP,而本试剂盒的单克隆cGMP抗体与乙酰化或非乙酰化cGMP 具有同样的亲和力。因此,NewEast_Bioscience_cGMP_ELISA试剂盒中的样品和标准品不需要乙酰化处理,从而明显缩短了分析时间,有效避免了乙酰化过程中的有机试剂的使用,为大家提供了一个更安全、更健康的工作环境。
工作原理:
本试剂盒利用竞争酶联免疫分析方法来测定细胞提取物或体外鸟苷酸环化酶实验中的cGMP的水平。简而言之,将羊抗鼠抗体包被在酶标板上,细胞提取物或体外鸟苷酸环化酶实验中的cGMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cGMP竞争性的结合抗cGMP单克隆抗体,已知的cGMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育,洗掉所有试剂,加入底物进行显色。将多孔板置于酶标仪上,于450nm 波长下,进行读数。黄光强度与样品中cGMP的浓度呈反比关系。基于cGMP标准品所得曲线,通过测得的光密度可以计算出样品中cGMP的浓度。
研究背景:
cGMP作为独特的第二信使,可调节细胞对各种外源和内源信号分子的反应。 cGMP主要通过激活蛋白激酶、控制特定的离子通道、磷酸二酯酶调节细胞环核苷酸浓度来调节不同的生理过程,如血管平滑肌松弛、上皮细胞电解质运输、骨生长、白细胞迁移、轴突引导、精子运动、血小板蔓延以及血管通透性等。
通过鸟苷酸环化酶可以实现GTP转化为cGMP。在哺乳动物中,存在2种类型的鸟苷酸环化酶:可溶性及膜结合的鸟苷酸 环化酶。可溶性环化酶在一氧化氮与血红素辅基结合后,即被激活。七层膜结合鸟苷酸环化酶(即跨膜鸟苷酸环化酶或鸟苷酸环化酶微粒)已被证实存在于人类基因组中,鸟苷酸环化酶A和B 是利尿钠肽受体,鸟苷酸环化酶C能被热稳定细菌肠毒素、鸟苷素和脲激活。跨膜鸟苷酸环化酶的活性亦受胞内信号通路的其他受体信号所调控。
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